抗菌检测 抗菌剂抗菌性检测方法

时间：2022-06-17作者：广州市微生物研究所集团股份有限公司浏览：236

随着工业的飞速发展和人们生活水平的提高，人们对环境和自身健康的关注度越来越高，特别是在SARS和禽流感之后，人们更加关注抗菌剂的开发和研究和抗菌产品。由于抗菌剂和抗菌产品的多样性，很难用统一的方法评价其真正的抗菌效果。了解国内外抗菌产品和杀菌剂的检测方法，有助于企业正确、科学地评价产品的抗菌性能，提高产品竞争力。

条款

抑菌：防止或抑制微生物生长繁殖的作用；

杀菌：杀灭微生物营养体和繁殖体的作用；

杀菌值（率）：细菌与样品接触一定时间前后，活菌的对数值或细菌减少百分比之差。

抑菌值（率）：与标准样品和处理过的抑菌样品接触一定时间后，活菌的对数值之差，或细菌减少的百分比；

1.抗菌检测

1.1抗菌剂的分类

抗菌剂：指在一定时期内能使某些微生物（细菌、真菌、酵母菌、藻类和病毒等）的生长或繁殖保持在必要水平以下的化学物质。

抗菌剂大致分为**抗菌剂和无机抗菌剂两大类：

无机抗菌剂以银、锌、铜等为主要原料，以无机填料为载体制成无机抗菌剂，具有良好的耐高温性；有些**抗菌剂以酯类、醇类、酚类为主要原料，耐高温性低，一般在200℃以下，个别为300℃，杀菌时间短，偶有沉淀等现象.

1.2 抗菌剂检测

抗菌剂的检测方法也很多，常用的评价方法有较低抑菌浓度（MIC）和较低杀菌浓度（MBC）

1.2.1试管法

优点：操作简单，对仪器没有严格要求

缺点：判断结果的人为因素大，不准确，样本量大；

在消毒技术规范中引入。

将样品稀释至不同浓度，加入无菌试管中，每支试管中加入一定浓度的细菌，培养一定时间后，用肉眼观察培养液的浊度。如果清晰，则表示没有细菌生长。 ，细菌的生长受到抑制。然后将所有澄清管在培养基表面划线，如果没有细菌生长，则细菌已被杀死。在此基础上判断样品的较低杀菌浓度和较低抑菌浓度。

样品A菌株金黄色葡萄球菌ATCC 6538Con.MIC6.25ppmC/C/C3.12ppmC/C/T1.56ppmT/T/T0.78ppm T/ T/T样品A试管法MIC结果：3.12ppm

1.2.2 96孔板-酶标仪法

优点：机器解释结果，准确率高，样本量小；

缺点：对实验室仪器要求较高；

可以根据不同的样品选择不同的方法。对于较贵重的样品或样品量较小时，可选择96孔板法。这种方法使用的样品很少，较终的结果是酶标。相对而言，读取OD值比肉眼观察清晰度更准确。

将样品稀释至初始浓度后，用多道移液器将其移入96孔板中，然后将样品成对稀释，稀释后加入培养液中，在酶标仪上读数文化之后。 OD值，没有生长的浓度点就是样品的MIC值；所有未生长的浓度梯度孔在固体培养基上划线分离后培养，无菌落生长的浓度即为样品的MBC值。

96孔板法

样品 A（金黄色葡萄球菌 ATCC 6538）

骗子

(ppm)空白6.253.121.560.78增长控制A0.0460.0480.048 0.1660.2250.215B0.0470.0460.0480.1630.2420.218C0.0470.0460.0470.1660.2080.206D0.0460.@ >0470.0460.1810.2270.211E0.0490.0470.0470.173 0.2040.218F0.0460.0450.0460.1620.2180.205G0.0470.0450.0450.1680.2080.213H0.0470.0430.@ >0440.1670.2180.208 样品 A 96 孔板法 MIC 结果：3.12ppm

比较以上两种方法：

1) 96孔板法的样品量仅为试管法的1/6。对于一些比较昂贵的样品，可以选择96孔板法。

2) 96 孔板可同时运行 10 个浓度、2 个对照样品和 8 个平行样品。仪器读数，结果的准确性较试管法有很大提高。

3.抗菌产品测试

抗菌产品的检测一般分为定性、定量和现场模拟三种方法：

定性法：定性判断产品的抗菌性能，比较通用，操作简单。

定量法：对产品的抗菌性能进行定量测试，并给出产品的具体抗菌/杀菌参数，可以更清楚地了解产品的抗菌性能，可表示为杀菌率（%）产品的杀菌活性值（对数折减值）等

抗菌检测  抗菌剂抗菌性检测方法

现场模拟实验方法：模拟产品实际使用情况，评价其抗菌功能。

抗菌产品根据应用领域的不同大致可分为几类：纺织品、高分子塑料制品、日化卫生用品和消毒剂和涂料。针对不同的产品类型，国内外有很多相应的检测方法，如：

3.1 纺织品：AATCC100； AATCC147； AATCC30； JIS L 1902； EN ISO 20 ** 5； EN ISO 20743； EN 14119； GB/T 20944.1.2； GB 15979； FZ/T 62015； FZ/T 73023等

3.2 高分子塑料制品和涂料：ISO22196； JIS Z 2801; ISO 846； ASTM G21； QB/T 2591等

3.3 日化卫生用品及消毒剂：EN1500； EN1276； EN 1040； GB 15981； GB/T 19877.3；消毒技术规范等

3.4 涂层：USP <51>； EP5.1.3、涂片后也可参照塑料制品的检测方法进行评价。

不同的方法直接导致不同的结果和评价标准。



4.抗菌产品检测常用的评价方法有两种：

4.1杀菌值（率）

4.2抗菌值（率）

4.3种仿真评价方法

4.1.1 杀菌率是抗菌产品接触一定量的污染菌后，一定时间内细菌的百分比或对数减少。

在本实验中，接触时间的确定非常重要，不同的接触时间可以得到不同的实验结果。

接触时间可以根据产品的使用情况而定，比如消毒剂、洗手液，一般接触时间只有1-10分钟；抗菌纺织品、塑料制品建议接触时间为18-24小时，许多材料不具备细菌持续生长所需的营养物质。与被污染的细菌接触24小时后，细菌自然会衰退，所以实验中接触时间一般不**过24小时。

4.2.1 当减少的细菌数量不是与原始污染细菌的浓度相比，而是与未经抗菌处理的相同材料的对照样品中剩余的细菌数量相比时相同接触时间后比较，反映产品的抗菌效果。抑菌值会随着对照品的不同而变化，对照品的选择对抑菌值的正确评价起到关键作用。

4.3.1 次模拟

模拟法实验是通过模拟产品的实际使用环境、方法和程序来评价产品的抗菌效果。

这种方法比较实用客观，特别是选择3.1-3.4种方法不适用的产品，比如气体灭菌产品，使用3.1- 3.4 种方法不能用来评估它。我们可以利用模拟的方法人为地营造一个污染空间，检测产品使用前后的细菌数量，评估产品的杀菌值（率）。

此外，我们还可以为一些洗涤产品模拟人体皮肤。我们可以使用人造皮肤或动物皮肤来代替人体皮肤，通过这些产品来模拟对我们的皮肤进行清洗或消毒的过程。计算产品使用前后的细菌减少量。

有些实验也可以直接在受试者身上进行，例如EN 1500-1997“化学消毒剂和防腐洗手液的测试方法和要求”，它使用了真人的洗手过程。 - 15人洗手过程中，对得到的杀菌率进行数学计算，较终得到产品的杀菌效果评价。

我国消毒技术规范[2008]消毒剂手部消毒模拟现场试验一章中有多种模拟方法。企业可以根据自己的产品需求进行选择。

结论

抗菌剂和抗菌产品的抗菌性能方法多种多样，每种方法都有其优点和缺点。因此，在抗菌检测中，必须根据样品的各种特性确定相应的检测方法，以便各企业正确评价自身产品的抗菌/杀菌性能。

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